ستصبح طرق التشغيل والتفاصيل والتفسيرات النظرية الخاصة بنا بمثابة إرشادات لعملياتك ، مثل وضع محاليل المغذيات وقوارير الخلايا ؛ إجراءات التعقيم لمعرفة طريقة عملها الصحيحة ، من الضروري الانتباه إليها في المرة الأولى.
تنشئة الخلايا مثل تربية الأطفال
الخلايا هشة حقًا. من الأفضل التحقق منه كل يوم لمنع الظواهر غير الطبيعية مثل نقص الماء وثاني أكسيد الكربون وانقطاع التيار الكهربائي ودرجة الحرارة غير الكافية في الحاضنة. من الضروري أيضًا حل هذه الحوادث في الوقت المناسب لتجنب المزيد من الألم الناجم عن التجارب المتكررة. .
يجب زرع الخلايا الجيدة في الوقت المناسب
يتم تمرير الخلايا على دفعات بحيث يكون هناك احتياطي حتى في حالة فشل إحدى الدُفعة. قد لا يكون الأمر سهلاً على الشخص العادي مثل هذا الأخير. لكن هذا هو درس دمي. بمجرد تلوث الخلايا ، تم القضاء على الجيش بأكمله. في ذلك الوقت ، يؤسفني أنني لم أحمي البذرة.
كل خلية لها خصائصها الخاصة ويجب معاملتها بشكل مختلف.
الخلايا هي نفسها البشر ، والخلايا المختلفة لها خصائص ثقافية مختلفة. كن حذرا في عملية الزراعة. تستخدم خطوط الخلايا المختلفة وسائط ومصلًا مختلفًا.
على سبيل المثال ، خلايا العضلات الملساء التي أقوم بتربيتها نشطة للغاية وأحب أن أكون مفعمة بالحيوية. في غضون 2-3 يوم ، سيكون هناك عدد كبير من السكان ، ولا أحب أن آكل وأشرب كثيرًا. إنه حقًا أفضل طفل يتم تربيته. الخلايا البطانية وخلايا العضلات الملساء لها شخصيات متشابهة ، لكنها غير صحية وقذرة للغاية. هناك العديد من الخلايا الإفرازية بداخلها ، لذا يجب تغييرها وغسلها بشكل متكرر. خلايا RAW264.7 مبهجة للغاية وصالحة للأكل. من الضروري إطعامهم في كثير من الأحيان. الصداع هو أن الخلايا تنشط بسهولة. من الجيد أن الزجاجة والبيئة التي يتم تربيتها فيها خالية من السموم الداخلية ، لكن من الصعب علي كأم إرضائها.
التحضير للعمل قبل التدريب
بما في ذلك التعامل مع المواد الاستهلاكية وتكوين الكواشف واختبار العقم وما إلى ذلك.
تنظيف الأواني الزجاجية. بالنسبة للأواني الزجاجية (زجاجة خلوية ، زجاجة تحتوي على محلول مغذي ، زجاجة بنسلين صغيرة ، إلخ) ، استخدم مسحوق الغسيل أولاً للتنظيف (انتبه إلى الزوايا الميتة) ، ثم اشطفها. نقع في محلول حامض لأكثر من 24 ساعة ، ثم اشطفه بالماء النظيف 10 مرات لإزالة محلول الحمض المتبقي. تُرج العبوات ، وما إلى ذلك ، بقوة أثناء الشطف. ثم ينقع في ماء مقطر مزدوج لمدة 24 ساعة. بعد التجفيف ، لفيها وجففيها على حرارة 160 درجة لمدة ساعتين.
تكوين الكاشف. كسائل لزراعة الخلايا ، بشكل عام ، يمكن استخدام أكثر من الماء المقطر المزدوج. وانتبه إلى تعديل قيمة الأس الهيدروجيني.
اختبار العقم. استخدم تعقيم الفلتر بشكل أساسي: مثل التربسين ، والمضادات الحيوية ، ومحلول G -418 ، والوسائط المختلفة ، وبيروفات الصوديوم ، والجلوتامين ، وما إلى ذلك.
يتم تخزين الكواشف في قسامات
بما في ذلك محلول المغذيات والبنكرياتين والمصل وما إلى ذلك.
المصل مهم بشكل خاص. يجب تخزين المصل بدرجة -20. إذا كان لا يمكن استخدام زجاجة واحدة في كل مرة ، فيمكن صرف 40-50 مل في زجاجات معقمة ومعالجة بالحمض ، أو حتى تخزينها في زجاجات البنسلين. بشكل عام ، يكون المصل الذي توفره الشركة المصنعة معقمًا ولا يتطلب ترشيحًا معقمًا. إذا تم العثور على الكثير من المواد المعلقة في المصل ، يمكن إضافة المصل إلى الوسط وتصفيته معًا ، ولا ينبغي تصفية المصل مباشرة. (لا يوجد تأثير على زراعة الخلايا في ظل الظروف العادية)
يجب إذابة المصل المعبأ في زجاجات تدريجيًا: يتم إذابة الثلاجة ذات 4 درجات تمامًا ثم تقسيمها إلى عبوات. أثناء عملية الذوبان ، يجب رجها بانتظام (احرص على عدم التسبب في فقاعات هواء) لجعل درجة الحرارة والتكوين متجانسين وتقليل حدوث التساقط. لا تذوب مباشرة من -20 درجة إلى 37 درجة ، حيث تتغير درجة الحرارة كثيرًا ، مما قد يتسبب بسهولة في تخثر البروتين وهطول الأمطار.
يشير تعطيل الحرارة إلى تسخين المصل المذاب بالكامل عند 56 درجة لمدة 30 دقيقة. بعد أن ترتفع درجة حرارة الحمام المائي إلى 56 درجة ، ضعي المصل وانتظري حتى ترتفع درجة الحرارة إلى 56 درجة وعدي الوقت ، ورجيها بشكل عام بالتساوي مرة كل 5 دقائق أو نحو ذلك. الغرض من هذه المعالجة الحرارية هو تعطيل المكونات التكميلية في المصل. ما لم يكن ضروريًا ، لا يتم إجراء هذه المعالجة الحرارية بشكل عام لأنها ستؤدي إلى زيادة كبيرة في الرواسب وتؤثر على جودة المصل. انتبه لتأثير تغيير المصل (بما في ذلك الدُفعات المختلفة) على الخلايا.
شعور قوي بالعقم
قبل التجربة ، تم تعقيم المنضدة فائقة النظافة بواسطة الأشعة فوق البنفسجية لمدة 30 دقيقة ، وتم مسح سطح العملية المعقمة بنسبة 70 في المائة من الإيثانول ، وتم تشغيل مروحة المنضدة فائقة النظافة لبضع دقائق قبل بدء العملية التجريبية .
لمعرفة المزيد حول زراعة الخلايا المختبرية ، يرجى النقر فوق: http://www.shjasw.com/
