مبدأ الكشف عن الحمض النووي

مبدأ الكشف عن الحمض النووي

هذه المجموعة مغطاة مسبقًا بمستضد مؤتلف جيني لفيروس كورونا الجديد (2019- nCoV)

صفيحة ، ومع جسم مضاد أحادي النسيلة IgA مضاد للإنسان يحمل علامة إنزيم كعلامة ، باستخدام طريقة ELISA غير المباشرة

لاكتشاف الجسم المضاد IgA لفيروس كورونا الجديد (2019- nCoV) نوعيًا في مصل الدم البشري.

بعد إضافة معقد التفاعل إلى الركيزة TMB ، تم إنهاء التفاعل ، وقياس OD لكل بئر بطول موجة 450 نانومتر.

يتناسب حجم قيمة OD مع محتوى الجسم المضاد المراد اكتشافه.

【نموذج المتطلبات】

1. استخدام عينات دم جديدة. إذا كنت تريد حفظها ، يمكنك تبريدها من 2 إلى 8 درجة لمدة 48 ساعة أو تجميدها بدرجة -20.

يعيش. تجنب التجميد والذوبان المتكرر (أكثر من 3 مرات).

2. تجنب استخدام العينات القابلة للذوبان أو العكرة أو الدهنية.

3. إذا كانت العينة بحاجة إلى النقل ، فيجب حفظها عند 2 ~ 8 درجة أو مجمدة.

4. تجنب إضافة مضادات التخثر أو العوامل الواقية أو المواد الحافظة للعينة ، حتى لا تؤثر على نتائج الاختبار.

【طريقة الفحص】

1. أخرج الطقم من الثلاجة واضبط درجة حرارة الغرفة (15 دقيقة) ، ثم قم بإزالة التفاعل المغلف مسبقًا

يجب أن تكون محمولة على متنها وتفريغها. خفف محلول الغسيل المركز 1:30 بالماء المقطر أو منزوع الأيونات للاستخدام.

2. تخفيف العينة: تمييع العينة المراد اختبارها بمخفف العينة 1: 100 (العينة 2uL --- العينة

مخفف 200uL) ، اخلط جيدًا (أو خفف مباشرة في اللوحة جيدًا ، أي أضف 200ul عينة مخفف إلى اللوحة جيدًا ، أضف عينة 2ul واخلطها).

3. أضف عينة: أضف 100uL من العينة المخففة إلى بئر اللوحة (إذا تم تخفيفها في بئر اللوحة ، فهذه الخطوة غير مطلوبة

خطوة). ضع تحكمًا سلبيًا وإيجابيًا (100 ميكرولتر / بئر ، غير مخفف) في كل بئر ، وقم بإعداد بئر تحكم فارغ

(إضافة مخفف 100uL عينة) ، رج وخلط.

4. الحضانة: 30 دقيقة عند 37 درجة. تخلص من السائل الموجود في البئر ، اغسل الطبق 3 مرات بمحلول الغسيل ، في كل مرة

بعد البقاء لمدة 30 ثانية ، تخلص من السائل الموجود في الفتحة واتركه حتى يجف على الورق الماص.

5. يضاف الإنزيم المتقارن: قطرتان (أو 100 ميكرولتر) لكل بئر ، ويخلط جيدًا ويحضن عند 37 درجة لمدة 20 دقيقة. اغسل 3 مرات على النحو الوارد أعلاه واتركها حتى تجف.

6. تطوير اللون: أضف قطرة من مطور اللون A و B (أو 50uL لكل منهما) إلى كل بئر ، ثم رجها واخلطها جيدًا ، على 37

احتضان لمدة 10 دقائق.