تطبيق زجاجة المصل
زجاجة المصل مصنوعة من زجاج البورسليكات منخفض الاستخراج ، وتفي الزجاجة الشفافة عديمة اللون بمتطلبات USP Type I و ASTM E 438 Type I Standard Class A. يمكن تعقيمه عند 121 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة ، ويمكن تقسيمه إلى 125 مل ، 250 مل ، 500 مل ، 1 لتر ، 2 لتر وفقا للحجم.
زجاجة المصل هي حاوية لتخزين المصل ، والتي تتكون عموما من مادة PET عن طريق عملية نفخ تمتد الحقن. الوسط هو المغذيات اللازمة لنمو الخلايا. وفقا لمصدره ، يتم تقسيمه إلى وسط اصطناعي ووسط طبيعي ، وكلاهما يمكن تخزينه في زجاجات المصل.
زجاجة مصل
الوسط الطبيعي:
الوسط الطبيعي الأكثر استخداما هو المصل ، وهو في الأساس مصل العجل. يحتوي المصل على مجموعة متنوعة من عوامل نمو الخلايا والعوامل المعززة للالتصاق وموادها متعددة الفعالات. جنبا إلى جنب مع الوسط الاصطناعي ، يمكن للخلايا أن تتكاثر وتنمو بسلاسة. يجب تخزين المصل في زجاجات مصل خاصة عند -5 درجة مئوية إلى -20 درجة مئوية.
الوسط الاصطناعي:
يتم صياغة الوسط الاصطناعي بدقة وفقا لنوع وكمية المواد التي تتطلبها الخلايا. هناك العديد من الأنواع والمكونات المعروفة ، مما يسهل التحكم في الظروف التجريبية. يحتوي على الكربوهيدرات والأحماض الأمينية والدهون والأملاح غير العضوية والفيتامينات والعناصر النزرة وعوامل نمو الخلايا. ومع ذلك ، بالمقارنة مع الوسط الطبيعي ، لا يمكن استبدال بعض المكونات الطبيعية غير المعروفة بمكونات كيميائية معروفة. لذلك ، يجب أن يضيف الوسط الاصطناعي الأساسي المستخدم في زراعة الخلايا أيضا كمية معينة من مكونات الوسط الطبيعي للتغلب على الثقافة الاصطناعية. قاعدة غير كافية ، والممارسة الأكثر شيوعا هي إضافة مصل العجل.
شكل زجاجة المصل مربع ، سهل الفهم ، مقاوم لمعظم التآكل الحمضي والقلوي ، ودرجة حرارة التطريز هي -70 درجة مئوية ، ولا يزال لديها صلابة معينة عند -30 درجة مئوية. إنها حاوية تغليف جيدة ، سواء كانت متوسطة طبيعية أو ثقافة اصطناعية. يمكن تخزينها في زجاجات المصل.
لعزل وزراعة وتحديد الخلايا السلفية البطانية لدم الحبل السري البشري وإنشاء سقالات وعائية غير خلوية عن طريق تحسين طريقة ذوبان الجليد
استكشاف الجدوى وقيمة التطبيق السريري للخلايا السلفية البطانية المعزولة والمستزرعة من دم الحبل السري البشري.
الطرق: تم جمع دم الحبل السري للأجنة التي تخضع لعملية قيصرية كاملة المدة في قسم أمراض النساء والتوليد ، أول مستشفى تابع لكلية بنغبو الطبية ، ووضعها في زجاجة مصل تحتوي على 50U / ml الهيبارين تحت ظروف معقمة ، وتخزينها في صندوق ثلج 4 درجات مئوية ، ونقلها إلى الخلايا في غرفة الثقافة ، تم الحصول على خلايا دم الحبل السري أحادية النواة عن طريق الطرد المركزي المتدرج الكثافة. تم تقسيم الخلايا أحادية النواة التي تم الحصول عليها إلى قسمين ، وأضيفت مصل ربلة الساق الجنينية M199 المتوسط (FCS-M199) والمصل الذاتي M199 المتوسط (AS-M199). وتم زرعها في أطباق الثقافة مع وبدون فيبرونيكتين البشري (HFN) (تم وضع علامة عليها: F (0) ، F (1) ، A (0) ، A (1)) على التوالي. في المختبر الحث ، تم إجراء التمايز والتوسع.
لوحظت التغيرات المورفولوجية للخلايا الملتصقة خلال عملية الحث والتمايز بأكملها ، وتم تحديدها من زوايا مختلفة جنبا إلى جنب مع التقنيات ذات الصلة مثل الكيمياء النسيجية المناعية والتألق المناعي وقياس التدفق الخلوي.
النتائج: بعد 12 يوما من الثقافة، بدأت خلايا دم الحبل السري أحادية النواة في الالتصاق. بعد 3D ، بدأ شكل المغزل في الظهور ، ثم زاد عدد الخلايا الملتصقة تدريجيا وأصبح تدريجيا على شكل مغزل. عند استزراعها لمدة تصل إلى أسبوع واحد ، تتشكل مستعمرة نموذجية مع خلايا مغزل حول الخلايا المستديرة في المركز. عندما تم استزراع الخلايا لمدة 14 يوما ، اتصلت مجموعات الخلايا المترابطة تدريجيا وشكلت بنية تشبه الشبكة. في الوقت نفسه ، مع الزيادة المستمرة في وقت الزراعة ، بدأت خلايا المغزل الطويلة أيضا في التقصير تدريجيا ، وأظهرت تغييرا نموذجيا يشبه حجر الرصف.
تم استزراع الخلايا الملتصقة لمدة أسبوع واحد ولوحظ أن عدد الخلايا في الوسط مع الفيبرونيكتين البشري كان أعلى بكثير من ذلك الذي لا يحتوي على فيبرونيكتين بشري ، ولم يكن هناك تغيير كبير في عدد الخلايا في الوسطين المختلفين. المواد الاستهلاكية #Instrument #
