بريد إلكتروني

emily@rollmed.com.cn

واتساب

8613968181618

4 أسباب للتلوث أثناء تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل

Jan 26, 2022 ترك رسالة

بسبب تفشي فيروس كورونا الجديد ، تسارع بناء مختبرات تضخيم الجينات PCR في أماكن مختلفة تدريجيا. يعد الكشف عن الحمض النووي الفيروسي معيارا مهما لتشخيص الالتهاب الرئوي التاجي الجديد. يعتمد مختبر PCR ، المعروف أيضا باسم مختبر تضخيم الجينات ، تقنية البيولوجيا الجزيئية. من خلال تضخيم شظايا الحمض النووي ، يمكن اعتباره أيضا تكرارا خاصا للحمض النووي في المختبر. يستخدم نظام تتبع الجينات لفهم محتوى الفيروس في جسم الإنسان ، ويمكن أن تصل دقة الكشف إلى مستوى النانومتر. ينتمي الكشف عن الحمض النووي الجديد لفيروس كورونا أيضا إلى هذه الفئة من التكنولوجيا وهو معيار مهم لتشخيص الالتهاب الرئوي التاجي الجديد.

يعمل مختبر تضخيم جين PCR بشكل أساسي على تضخيم قالب الحمض النووي للكشف عنه. ويمكن ملاحظة أن التلوث المتبادل من المرجح أن يحدث في المختبر، مما يؤدي إلى نتائج إيجابية خاطئة في عينات الاختبار. لذلك ، فإن مختبرات PCR لديها متطلبات ومعايير تصميم صارمة.

الآن تم استخدام تقنية PCR على نطاق واسع في مجالات الأمراض المعدية ، واستهداف الأورام ، وعلم الوراثة الإنجابية ، وما إلى ذلك. ومع ذلك ، نظرا للتضخيم المتعدد والكبير للحمض النووي الذي سيتم اختباره بواسطة هذه التكنولوجيا ، حتى كمية صغيرة جدا من التلوث يمكن أن تؤدي بسهولة إلى الثانية ، PCR المتطلبات التقنية عالية نسبيا ، والعملية التجريبية معقدة. إذا كان هناك سهو في الروابط الوسيطة ، فقد تحدث نتائج سلبية خاطئة.

1. إنه تلوث منتجات تضخيم PCR. وهو أيضا السبب الأكثر شيوعا للتلوث. بعد التضخيم المتكرر لمنتجات PCR ، تتجاوز كمية النسخ المتماثل بكثير حد الكشف عن PCR ، لذلك حتى كمية صغيرة جدا من التلوث كافية للتسبب في إيجابيات خاطئة في النتائج التجريبية.

2. تلوث الكاشف. أثناء إعداد الكاشف ، يمكن أن يؤدي الاتصال بالحاويات الملوثة والماصات ونصائح الماصة والمحاليل وما إلى ذلك إلى تلوث الكواشف.

3. العينة المراد اختبارها ملوثة. الحاوية التي توضع فيها العينة ملوثة أو العينة ملوثة بسبب سوء ختم الحاوية؛ ثانيا ، سيؤدي استخدام الماصات الملوثة أو أطراف الماصة أثناء عملية استخراج الحمض النووي إلى تلوث العينة ؛ بالإضافة إلى ذلك ، تحتوي بعض العينات على فيروسات ، إذا انتشرت في الهواء ، فقد يحدث تلوث متبادل.

4. تلوث الهباء الجوي. إذا كان الهباء الجوي يحتوي على فيروسات وملوثات أخرى وينتشر في الهواء ، فمن المحتمل جدا أن يسبب تلوث منتج PCR. يتم إنشاء الهباء الجوي عن طريق الاحتكاك بين الهواء وسطح السائل. يمكن أن يؤدي فتح الغطاء وهز أنبوب التفاعل وشفط جهاز أخذ عينات التلوث بشكل متكرر إلى تكوين الهباء الجوي الذي يمكن أن يؤدي إلى التلوث المتبادل. بعد الحساب ، يمكن أن يحتوي جسيم واحد من الهباء الجوي على 48000 جزء ، لذلك يجب إيلاء اهتمام خاص للتلوث الناجم عن الهباء الجوي. طالما أن مختبر PCR ملوث ، فإن تقرير النتيجة السابق غير صالح ولا يمكن إجراء عمليات تجريبية أخرى. يجب تحديد مصدر التلوث وإزالته بدقة من أجل الحصول على نتائج تجريبية دقيقة وفعالة.